概述新型一步法快速WB試劑盒是Western Blot,Dot blot檢測試劑盒,有節約實驗時間、檢測靈敏度高、背景低和系統穩定等多種優點。常規的Western Blot間接法檢測過程(封閉,洗滌,一抗結合, 洗滌,二抗結合和洗滌)需要4-5個小時,實驗流程復雜且需要多步條件優化,使用新型一步法快速WB試劑盒(兔)可以在不減弱實驗靈敏度的情況下,將封閉,洗滌,一抗結合, 洗滌,二抗結合合并為一個步驟,把實驗時間銳減為30分鐘左右。膠上的蛋白轉移到印跡膜上后,使用一抗、反應液及稀釋液混合而成的抗體孵育液短時間孵育印跡膜后,經簡單洗滌,即可進行發光或顯色檢測。特點操作簡單,將常規間接法Western Blot所需的4-5個小時縮短到30分鐘左右;無需額外添加二抗,節約試劑;背景低,可重復性好;適用于HRP系統發光或顯色系統。應用應用于Western Blot,Dot blot檢測。有分別針對目的蛋白一抗為兔(Q510049)和鼠(Q510050)來源的兩種試劑盒。組份封閉液A;封閉液B;抗體反應液HRP(兔);抗體稀釋液;洗滌液(10X)操作說明
概述新型一步法快速WB試劑盒是Western Blot,Dot blot檢測試劑盒,有節約實驗時間、檢測靈敏度高、背景低和系統穩定等多種優點。常規的Western Blot間接法檢測過程(封閉,洗滌,一抗結合, 洗滌,二抗結合和洗滌)需要4-5個小時,實驗流程復雜且需要多步條件優化,使用新型一步法快速WB試劑盒(兔)可以在不減弱實驗靈敏度的情況下,將封閉,洗滌,一抗結合, 洗滌,二抗結合合并為一個步驟,把實驗時間銳減為30分鐘左右。膠上的蛋白轉移到印跡膜上后,使用一抗、反應液及稀釋液混合而成的抗體孵育液短時間孵育印跡膜后,經簡單洗滌,即可進行發光或顯色檢測。特點操作簡單,將常規間接法Western Blot所需的4-5個小時縮短到30分鐘左右;無需額外添加二抗,節約試劑;背景低,可重復性好;適用于HRP系統發光或顯色系統。應用用于Western Blot,Dot blot檢測組份封閉液A;封閉液B;抗體反應液HRP(鼠);抗體稀釋液;洗滌液(10X)操作說明
DNA提取EZ-Kit是一種簡化的NaI法,可從組織提取物,血液樣品,細胞裂解物,蛋白質或生物制藥樣品中純化出幾微克的DNA。整個過程包括在一個微量離心管中進行兩個簡單的孵育和離心步驟,而不使用任何有害物質,如苯酚和CHCl3。優化的洗滌劑可在高蛋白濃度下提取DNA,或在必要時增強蛋白酶K消化。純化的DNA足夠純化許多DNA應用,例如PCR,實時PCR,限制性內切酶消化和克隆,DNA測序或Picogreen熒光染色。試劑盒組成:100uL糖原溶液1ml洗滌劑組合液25ml NaI法溶液30 mL洗滌緩沖液(無酒精) 試劑盒不包含:乙醇(洗滌緩沖液)異丙醇(用于DNA沉淀)2ml微復合管(離心或等效的)微型離心機(離心或等效的) 溶液的制備: 加70ml乙醇洗滌液和混合 加50uL糖原NaI溶液 加2uL糖原洗滌液DNA提取程序:1、每個樣品添加500uL或稀釋至2 mL微離心管2、加20uL洗滌劑組合液到每管,并輕輕的渦旋3、選項:如果高濃度的蛋白質干擾DNA提取和DNA分析,每個樣品中吸取添加20uL消化蛋白酶K(10mg/ml),在60°C, 20min,然后在95°C滅酶 5min4、加500uL NaI溶液到每個微管中,并輕輕的渦旋5、50°C孵育10分鐘6、加900uL異丙醇渦旋7、室溫孵化30min8、離心機12000轉15min9、輕輕倒出或吸出上清液10、添加1.8ml洗滌緩沖液(含酒精),渦旋11、離心機12000轉10min12、輕輕倒出或吸出上清液13、風干DNA14、添加20-60uL水輕輕渦旋溶解DNA15、純化的DNA可進行PCR、實時定量PCR、酶切、DNA測序、熒光染色法流程圖:說明書 :?
項目描述59020EZ夾套件59022EZ夾子,盒裝/ 20059027EZ夾,1000盒59027-5EZ夾子,一箱50009毫米傷口閉合套件非常適合快速閉合傷口,提供*大的夾持力,同時將創傷降至*低...而且,它們比傳統的縫合線和針頭使用起來更容易,更快捷。像釘書釘槍一樣使用Applier輕松快速地閉合傷口。無需幫助。傷口愈合后,可以使用夾子拆卸器輕松卸下夾子。所有組件都可以單獨購買。9mm傷口閉合套件特征?較小的“牙齒”可更好地夾緊和封閉動物的皮膚?傷口愈合后更容易取下夾子?減少對動物的傷害……尤其是老鼠?可以與現有的9mm取紙器和卸妝器一起使用非常適合快速閉合傷口,以*小的創傷提供*大的夾持力……并且它們比傳統的縫合線和針頭使用起來更容易,更快捷。像釘書釘槍一樣使用Applier輕松快速地閉合傷口。無需幫助。傷口愈合后,可以使用夾子拆卸器輕松卸下夾子。所有組件都可以單獨購買。9毫米夾子的架子單獨包裝在熱封的可剝離信封中,以保持清潔并易于搬運和存放。EZ Clips?裝在一個機架中20個,每箱10個(共200個)機架,每箱50個(共1000個)機架。夾子是無熱原的且非無菌的??筛邏簻缇乃芰习b可對夾子進行滅菌,而無需將其從包裝中取出。EZ Clip?套件包括Applier,1000個9mm傷口夾(編號59027)和卸妝盒。各個組件可以單獨訂購。高壓滅菌法Stoelting**包裝20根高壓滅菌聚丙烯夾子的架子,可提供****的滅菌和存儲便利性。
AES CEInfinite全柱成像等電聚焦毛細管電泳系Advanced Electrophoresis Solutions Ltd (AES) 位于加拿大安大略省的生命科學和蛋白質化學領域高科技公司,推出新一代毛細管電泳儀系統-毛細管電泳等電聚集-全柱成像檢測技術(cIEF-WCID),徹底顛覆了傳統電泳技術在蛋白質分析中的定義,通過cIEF-WCID技術,復雜蛋白質的分離和 pI點的測定變的異常輕松。成為蛋白質藥物和抗體藥物研發和質量控制、蛋白質組學基礎研究和生物相互作用機制探索的強有力工具,同時也是食品安全中功能蛋白檢測、育種、奶制品、肉類等新的技術手段。技術特點:1) 可以得到超高蛋白質pI點的分辨率(△pI<0.01)2) 超高通量的蛋白質和抗體藥物分析(分析時間<10 min)3) CEInfinite采用CMOS(Complementary Metal-Oxide-SemicondutorTranslator,互補性金屬氧化物半導體)作為成像檢測技術,代替了傳統的CCD成像技術,具有高速數據采集、寬線性范圍、綠色節能、超高檢測靈敏度和和儀器穩定性等優勢,這是工業標準的重要基礎4) CEInfinite擁有超高穩定性的自動進樣系統(Alcotte719)和功能強大的操作和數據處理軟件,具有自動數據匹配、pI值自動軟件計算等功能5) 目前世界上全的pI標記物 (pI Marker): 30種pI Marker(pI point from 2.8 to11);完善的pH載體(carrier ampholytes):四種專有技術獨有的Aeslytes pH 3-10、 Aeslytes pH 2.5-5、 Aeslytes pH 5-8 和 Aeslytes pH 8-10.5,并可以根據客戶需要定制高分辨的pH范圍6) 完善和多樣化的涂層毛細管Cartridge,極大提高了蛋白質分離的靈敏度和分辨率7) 儀器的安裝維護簡單、快捷8) 完備的蛋白質和抗體分析的解決方案和售前和售后團隊9) 體積小、重量輕(14公斤),適于現場便攜式分析;綠色低耗能(僅1瓦電耗)技術原理CEInfinite 顯示的是蛋白樣品在整個毛細管分離柱(長度:50 mm,內徑:100 - 200 μm)內在不同分離時間點的濃度分布。當毛細管中充入兩性電解液和樣品后,加高電壓開始聚焦,CMOS 成像傳感器連續對整根毛細管進行紫外吸收成像(成像時間間隔 10 - 60 s),直至 cIEF 分析完成,整個過程大約 5-10 min。超高的工作效率CEInfinite 省去了傳統 cIEF 的移動過程和凝膠 IEF 的染色過程,分析時間可縮短至 15 min / 樣品,分辨率可至 0.01 pH。CEInfinite 超快的分析速度和全程可視的特點,使得蛋白藥物分析方法的開發變得極其簡單。方法開發的時間從傳統的幾個月縮短至幾個小時,普通的單抗方法開發僅需 1 小時,且方法易于實現標準化操作,能夠提供一致的數據分析結果,是蛋白質、多肽、細菌、病毒、疫苗、電荷不均勻性分離和定量的強有力工具。主要特色? 高掃描速率 CMOS 圖像傳感器,成像速度快,分辨率高? 長壽命 LED 紫外光源,壽命 2 年以上,節約維護成本? 全自動高通量樣品操作,定量精度高,重復性好? 圖形化軟件界面,操作簡單? 符合 FDA 21 CFR PART 11 的要求廣泛的應用方向CEInfinite 系統嚴格遵循 FDA 21 CFR PART 11 法規的要求。其出色的重復性,超高的分辨率以及快速的分析速度,能為生物制藥企業用戶提供*優的蛋白質分析方法,幫助企業縮短藥物的研發周期,加快藥物上市速度,可廣泛應用在: 藥物研發、克隆篩選、生產過程監控、藥物制劑研究分析、藥物穩定性研究、質量控制分析等。全面的生物耗材助理您實驗室更好、更快開展工作兩性電解質載體兩性電解質載體是毛細管電泳分離和檢測蛋白*重要的部分。兩性電解質載體優秀的 pH 線性梯度和低蛋白相互作用實現了蛋白的出色分離,并具有良好的重現性,低紫外吸收的特點確保*小的基線噪音。毛細管分離柱 種類豐富的毛細管分離柱,滿足您的分析需求。? 多種類型分離柱(FC/DB/PA),滿足不同性質的蛋白質分離? 提供 100 μm 內徑和 200 μm 內徑兩種規格的分離柱? 200 μm 內徑的分離柱其靈敏度比 100 μm 內徑的分離柱提高了 100%? 大尺寸內徑的分離柱具有低進樣阻力,不易堵塞,更快的進樣速度的特點pI 標記物豐富的小分子的標記物助您實現蛋白質藥物的等電點的準確測定和質量控制? 32 種 pI 標記物? pI 范圍寬(2.8-11)? 小分子設計,結構穩定配套的試劑耗材清單歡迎咨詢上海睿鉑賽生物科技有限公司免費熱線:400-7780-786公司總機:021-34681336周末和緊急情況下聯系:18221539942咨詢郵箱:service@rebiosci.net網址:www.ccidcentury.com地址:上海市宜山路1728號305
Unique microtiter plate enzyme immunoassay for the quantitation of intact AAV9 wt virions, AAV9 recombinant virions or assembled and intact empty capsids of human Adeno-associated Virus 9. The capture-antibody detects a conformational epitope not present on unassembled capsid proteins.The ADK9 antibody is used as capture and detection antibody in the AAV9 Titration ELISA (PRAAV9).Cat. No.: PRAAV9Quantity: 96 testsDetails 1Details 2Form suppliedIntended useUnique microtiter plate enzyme immunoassay for the quantitation of virions and or assembled empty capsids of human Adeno-associated Virus 9. The capture-antibody detects a conformational epitope not present on unassembled capsid proteins.Kit Control/Standard:AAV9 empty capsids lyophilizedReagent kit, 12 x 8-well stripsResearch use onlyAdeno-associated viruses (AAV) are nonpathogenic ssDNA viruses, which are a subject of intense studies as viral vectors for gene therapy. The virus transduces a variety of dividing and nondividing cells showing long-term gene expression with low cellular immune response. AAV has been used in several clinical trials (e.g. FIX, CFTR, Parkinson’s, Canavan disease) showing no serious vector-related adverse effects. AAV9 is especially useful for applications in the CNS. Methods for the characterization of AAV preparations currently include titration ELISA, real-time PCR, DNA dot blot, determination of transducing units, infectious center assay, SDS-PAGE or electron microscopy.AAV preparations contain up to 10fold more empty virus capsids than filled, therapeutically active virus particles. Since both full and empty particles can induce an immune reaction, it is crucial for in in vivo appilcations to determine the complete particle titer.Immunotitration by PROGEN's AAV9 Titration ELISA offers a fast, sensitive and reproducible method for titration of intact AAV9 wt virions, AAV9 recombinant virions or assembled and intact empty AAV9 capsids.The ELISA principle:The assay is based on the sandwich ELISA technique where a monoclonal antibody (mab) specific for a conformational epitope on assembled AAV capsids is coated onto the plate and is used to capture AAV particles from the specimen.The detection of captured AAV particles is a two-step process.A biotin-conjugated mab is bound to the captured AAV particles.A streptavidin peroxidase conjugate reacts with the biotin molecules. The addition of the substrate results in a color reaction which is proportional to the amount of specifically bound viral particles.Comparison of AAV Quantification Methods:Each of the commonly used quantification methods has its pros and cons:qPCR is widely used, but suffers from several issues such as sample preparation, primer design, or PCR efficiency that can lead to high inter-laboratory variation of results.Digital droplet PCR methods overcome some of the limitations of qPCR. However, variations between labs can still occur due to different sample processing protocols.Dot blot is a simple and quantitative method, if reliable reference material is used. However, it suffers from the limited linearity and dynamic range of western blotting in general.Given the practical drawbacks of the aforementioned techniques, a conventional sandwich ELISA currently appears to be superior in terms of inter- and intralaboratory variation as well as ease of use. Therefore, it represents the best format for reliable and reproducible quantification of total rAVV capsid titers.Use of shuffled/mutated AAV:The recognition of shuffled/mutated AAV vectors depend on the specific capsid region which is affected by the shuffling/mutation. The capture antibodies used for PROGEN’s AAV ELISAs bind specific and, in some cases, well defined conformational epitopes. These epitopes are generated by the capsid assembly of the corresponding AAV serotypes. A first indication that the ELISA might recognize your shuffled/mutated AAV vector is the presence of the antibody-binding epitope. However, changes in the protein sequences of the capsid proteins might also influence conformation of the proteins, hence the conformation of the epitopes presented on the AAV capsid. This might influence binding affinity of the antibody and affect determination of the titer based on the (non-shuffled) Kit Control provided with the AAV ELISA kit. Since these properties strongly depend on the specific shuffling/mutation performed, PROGEN cannot guarantee successful and precise quantification of your shuffled/mutated AAV vector. Even if the antibody binding epitopes are still present on your shuffled/mutated AAV capsid, your assay needs to be tested and optimized for your specific AAV vector.PROGEN highly recommends the production and calibration of a suitable (shuffled/mutated) Kit Control, to ensure reliable titer determination of your individually shuffled/mutated AAV vector with PROGEN ELISA kits.Limited Use Label License: Research Use OnlyProduct is exclusively licensed to PROGEN Biotechnik GmbH. The use of these products for the development, manufacturing and sale of secondary products/derivativeswhich are based on the purchased products and/or which include the purchased product require a royalty based sub-license agreement.
經常做細胞實驗的你,想必一定遇到過這個難題:細胞收集,究竟哪種方案*合適?離心收集or瓶內裂解or胰酶消化?01 細胞收集方法優劣對比離 心 法優點:離心法操作方便,同時我們可根據收集到的細胞沉淀來加入適量的裂解液,從而 能夠控制樣品蛋白的濃度。缺點:在離心過程中卻容易造成細胞破碎而降低總蛋白得率,同時會造成細胞外基質 (ECM)的丟失,從而造成樣品蛋白質圖譜的不完整。注:細胞外基質(ECM)是由細胞外大分子和礦物質(如膠原蛋白、酶、糖蛋白和羥基 磷灰石)組成的三維網絡,為周圍細胞提供結構和生化支持。因為多細胞在不同的多細胞譜 系中獨立進化,細胞外基質的組成因多細胞結構而異;然而,細胞粘附、細胞間通訊和分化 是ECM的常見功能。細胞外基質主要由5類物質組成,即膠原蛋白、非膠原蛋白、彈性蛋 白、蛋白聚糖與氨基聚糖,按分布部位劃分主要分為基底膜(Basement membrane)和間 質基質(Interstitial matrix)瓶 內 裂 解 法優點:瓶內裂解法*大的優點是可以有效的防止細胞在離心過程中破碎,能有效的提高 總蛋白得率,同時也能完整的保留細胞外基質(ECM)。缺點:操作會相對復雜,且不易控制加入的裂解液量,往往會造成總蛋白濃度低且粘度 高等情況;對于一些藥物處理的細胞和貼壁不牢的細胞,使用此方法在清洗階段也容易造成 細胞大量丟失。胰 酶 消 化 法優點:胰酶處理的細胞個體形態單一,不聚團,對細胞損傷小。缺點:會造成細胞外基質(ECM)的完全丟失,同時會剪切一些對胰酶敏感的蛋白,如 上圖右。對于WB蛋白樣品中是否含有對胰酶敏感的蛋白,我們往往不太確定,同時胰蛋白酶也 屬于外來蛋白質,如果不能做到徹底清除,同樣會污染我們的樣本。所以用于WB的細胞樣 品不建議使用胰酶消化法收集細胞。離心法:適用于懸浮細胞、貼壁不牢和藥物處理過的細胞;瓶內裂解法:適用于所有的貼壁細胞;在一般情況下,我們首推瓶內裂解法,其次離心法;不推薦胰酶消化法。02 細胞收集protocola. 瓶內裂解法(效果*佳):適用于所有的貼壁細胞1)吸凈培養基,用冰的PBS清洗細胞表面2遍(動作輕柔,防止細胞脫落),盡可能吸取 殘留的PBS。2)在冰上加入適量預冷的裂解液于細胞瓶、培養板或培養皿中,用移液管吹散貼壁的細 胞,對于貼壁緊的細胞也可使用細胞刮收集,收集裂解液,在冰上放置30min,期間每10min 上下顛倒混勻一次。b. 離心法:適用于懸浮細胞、貼壁不牢和藥物處理過的細胞1)使用細胞刮收集細胞懸液(連同培養基一起收集),4℃,500g離心5min,收集沉 淀,沉淀用預冷的PBS洗滌兩遍,收集細胞沉淀,盡可能吸取殘留的PBS。2)加入適量的裂解液,在冰上放置30min,期間每10min上下顛倒混勻一次。注:裂解液在使用前提前加入蛋白酶抑制劑,用于磷酸化抗體檢測的需要同時加入蛋白酶 抑制劑和磷酸酶抑制劑。
細胞樣本樣品量要求:1*107 cell/sample,提供兩份樣本,其中一份作為備份,分兩管盛放。淬滅試劑準備:稱取85g AMBIC(碳酸氫銨)加入到1000ml超純水中,得到85g/l的AMBIC溶液。然后量取600ml 甲醇,100ml AMBIC (85g/l),290ml 超純水水,混合,用12M 鹽酸調節pH至7.4,*后用超純水定容至1L即可。注意:由于pH的變化,淬滅試劑*好現配現用。懸浮細胞[1]樣本收集步驟:1. 對細胞進行計數,計算1*107個細胞所需要的體積(即1體積);2. 取5體積的淬滅試劑于試管中(試管的體積應為大于等于7體積),置于-20℃預冷;3. 快速從細胞培養液中取出1體積的細胞,放入含有淬滅試劑的試管中;4. 輕微震蕩試管10s,在1000g,4℃下離心1min,若細胞較小或細胞未沉淀,可適當加大轉速或延長離心時間,但不宜一次提升太多,以防止細胞破損;5. 除去上清;6. 將細胞放入液氮,30s后取出置于-80℃保存。貼壁細胞酶消化法[2]樣本收集步驟:1. 除去細胞培養基,迅速用預冷的 PBS 溶液清洗細胞,清洗兩次;2. 除去 PBS 溶液(一定要將 PBS 去除干凈,越快越好);3. 消化:加入胰酶,消化至部分細胞呈球狀;然后加入培養基,輕輕晃動,使培養基浸潤細胞終止消化,吸出剩余培養基;加入 PBS 吹打,懸浮細胞;(目的是把貼壁細胞消化下來,方便后繼處理,加入的溶液量及孵育時間可以根據自己實驗室具體情況進行修改);4. 快速計數,取1*107個細胞所需要的體積(即1體積);5. 快速放入預冷的5體積的淬滅試劑中,輕微震蕩離心管 10s;6. 轉子-20℃預冷,在 4℃,1000g 條件下離心 1min,若細胞較小或未沉淀,可適當加大轉速或延長離心時間,但不宜一次提升太多,以防止細胞破損;7. 除去上清,將細胞放入液氮中,30s 后取出保存在-80℃中。刮細胞法(針對很難用酶消化下來的貼壁細胞)[2]樣本收集步驟:1. 除去細胞培養基,迅速用預冷的 PBS 溶液清洗細胞,清洗兩次;2. 除去 PBS 溶液(越快越好);(不能計數的話,建議測代謝物之前做蛋白定量)3. 加入5體積淬滅試劑淬滅后用細胞刮分離細胞,將刮下的細胞轉入離心管中;4. 在4℃,1000g 條件下離心 1min 去除上清。5. -80℃保存,干冰運輸。注意事項:1. 取對數生長期,培養至同一時期的細胞,建議多準備樣本,以備后續使用;2. 液氮處理細胞時,注意防止離心管破碎導致樣本受損;3. 為防止樣本收集過程中細胞膜破裂,建議在全程操作不宜過度劇烈,切勿渦旋震蕩、高速離心或超聲等,同時避免反復凍融,以保證細胞膜不會破損,減少代謝組學分析影響;4. PBS清洗時,切勿沖走細胞,清洗充分后,盡量將PBS完全倒掉。收集方法參考文獻:[1]Christopher A Sellick, Metabolite extraction from suspension-cultured mammalian cells for global metabolite profiling, nature protocol, 2011.[2]Rahul Vijay Kapoore, Cell line dependence of metabolite leakage in metabolome analyses of adherent normal and cancer cell lines, metabolomics,2015.無需淬滅劑細胞樣本收集方法(備選方法,一般不建議使用)懸浮細胞[1,2]樣本收集步驟:1. 收集細胞并記數,1*107 cell/sample。2. 將收集的細胞進行4℃離心,5min,1200rpm。3. 使用PBS洗滌細胞,并在900rpm條件下離心。重復三次,去除PBS(盡量將PBS去除干凈)4. 將含有細胞的EP管,迅速放入液氮中30s。5. 放入-80℃冰箱保存。干冰寄送。貼壁細胞刮細胞法[3]樣本收集步驟:1. 將細胞用PBS進行多次清洗。2. 用細胞刮將細胞刮入微離心管中,。3. 將EP管迅速放入液氮中30s,然后進行凍干。4. 在-80℃冰箱保存。干冰寄送。酶消化法[4]樣本收集步驟:1. 除去細胞培養基,迅速用預冷的 PBS 溶液清洗細胞,清洗兩次。2. 除去 PBS 溶液(一定要將 PBS 去除干凈,越快越好)。3. 消化:加入胰酶,消化至部分細胞呈球狀;然后加入培養基,輕輕晃動,使培養基浸潤細胞終止消化,吸出剩余培養基;加入 PBS 吹打,懸浮細胞;(目的是把貼壁細胞消化下來,方便后繼處理,加入的溶液量及孵育時間可以根據自己實驗室具體情況進行修改)。4. 快速計數,取 1 體積的細胞。5. 轉子-20℃預冷,在 4℃,2500g 條件下離心 5min。6. 去除上清,迅速放入液氮速凍30s,-80℃保存。干冰寄送。收集方法參考文獻:[1]Dehui Xu, Yujing Xu et al. Alteration of metabolite profling by cold tmospheric plasma treatment in human myeloma cells. Cancer Cell Int. 2018[2]Zuzana Racovaa, Eva Anzenbacherova,et al. Metabolite profiling of natural substances in human: in vitro study from fecal bacteria to colon carcinoma cells (Caco-2). Journal of Nutritional Biochemistry. 2020[3]Sarah Hayton, arth L. Maker et al. Experimental design and reporting standards for metabolomics tudies of mammalian cell lines. Cellular and Molecular Life Sciences. 2017[4]Katja Dettmer,Nadine Nürnberger et al. Metabolite extraction from adherently growing mammalian cells for metabolomics studies: optimization of harvesting and extraction protocols. Anal Bioanal Chem. 2011.細胞培養液樣品量要求:200μL/sample,提供兩份樣本并分 2 個離心管存放(條件允許*好 500μL/sample)。樣本收集步驟:1.將培養液搖勻,快速從培養瓶中取出一定量的培養液,4℃條件下離心(1000g,10min);2.移取上清 500μL 至新的離心管中, 迅速放入液氮中淬滅,30s;3.淬滅后放入-80℃中保存。注意事項:寄送樣本時請放入足量的干冰以保持低溫條件【經驗值:快遞途中干冰消耗率約為 5KG/天,消耗速度與氣溫,泡沫箱厚度(>5cm)有直接關系,請酌情添加干冰】。收集方法參考文獻:[1]Silas G.Villas-Boas, Extracellular metabolomics: A metabolic footprinting approach to assess Wber degradation in complex media ,Analytical biotechnology, 2005.[2]Hanna Meyer, Hendrikje Weidmann, Methodological approaches to help unravel the intracellular metabolome of Bacillus subtilis. Microbial Cell Factories 2013, 12:69.[3]Farhana R. Pinu, Analysis of Intracellular Metabolites from Microorganisms: uenching and Extraction Protocols, metabolites, 2017.
Ethos Biosciences為糖尿病、內分泌和代謝研究提供科研原料。Ethos Biosciences提供的Albuwell ELISA和Creatinine Companion試劑盒是微量白蛋白尿測量的金標準試劑盒。
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近期上海疫情形勢嚴峻,根據當地疫情管控政策,上海全市進行靜態管理,從2022.3.18開始,解封日期等待通知,全員居家辦公,公司電話:021-34681336 400-400-7780-786 暫時無人接聽,敬請諒解,如需聯系我們,請聯系以下手機號: 經銷商/渠道商: 郝經理 18221516624(微信同號) 終端客戶: 劉經理 18221539942(微信同號) 技術支持:王經理 18221539964 (微信同號)
RPA試劑盒非常適合需要不使用熱循環儀就能在15分鐘內完成 DNA/RNA 擴增的實驗室以及想要靈活構建試驗體系的研究人員使用。TwistAmp??Liquid試劑盒提供經甘油穩定化處理的液態RPA試劑,該形態對于在實驗室執行 PCR 和其他基于酶的反應的任何人來說都非常熟悉。這些試劑各自裝于單獨的試管中,用戶可隨意從中移取任何量的酶混合液來構建自己所選的RPA反應體積,配制用于多次反應的預混液,或者以各種 RPA 組分比例進行實驗以優化試驗。 除具有室溫穩定性的凍干態TwistAmp? RPA試劑盒這一旗艦產品,本次新推出的?TwistAmp? Liquid試劑盒是現場或定點試驗開發的理想之選。液體形態讓實驗室更容易地在日常工作中使用快速簡單的RPA法(該方法有時甚至采用與PCR相同的引物)取代 PCR法,以及更容易地開發出定制的試驗。 RPA 產品組成:TwistAmp Basic Kit(凍干態)TwistAmp Basic Kit(液態) NEW!!!● 96 freeze-dried RPA pellets● 4 x 1 ml TwistAmp? Rehydration buffer● 1 x 250μl magnesium acetate (280mM)● 6μl of Control template● 45μl of Control primer mix● 50μl 20x Core Reaction Mix● 3ml 2 x Reaction Buffer● 500μl 280mM MgOAc● 550μl 10 x E-mix● 100μl of Positive control template● 45μl of Positive control oligo mix 相關擴展試劑盒額外提供試劑:◆ 100 μl 50x 外切酶 III (TwistAmp? Liquid exo/exo RT kits);◆ 100 μl 50x 逆轉錄酶 (RT) (TwistAmp? Liquid Basic RT/exo RT kits);◆ 100 μl of 陽性對照模板 (DNA with TwistAmp? Liquid exo/Basic kits, RNA with TwistAmp? Liquid Basic RT/exo RT kits);◆ 45 μl of 陽性oligo mix (oligo mix consists of primers for Basic/Basic RT kits, primers plus a ?uorescently labelled exo probe in the exo/exo RT kits)其他必需試劑(非試劑盒提供):◆ ddH2O; dNTPs; 寡聚核苷酸; RNase抑制劑(僅用于RT試劑盒) 產品信息:貨號品名規格TALQBAS01TwistAmp Liquid Basic Kit100 rxn以上TALQBASRT01TwistAmp Liquid Basic RT Kit100 rxn以上TALQEXO01TwistAmp Liquid Exo Kit100 rxn以上TALQEXORT01TwistAmp Liquid Exo RT Kit100 rxn以上
近期上海疫情形勢嚴峻,根據當地疫情管控政策,辦公樓暫時封閉篩查,從2022.3.18開始,解封日期等待通知,全員居家辦公,公司電話:021-34681336 400-400-7780-786 暫時無人接聽,敬請諒解,如需聯系我們,請聯系以下手機號: 經銷商/渠道商: 郝經理 18221516624(微信同號) 終端客戶: 劉經理 18221539942(微信同號) 技術支持:王經理 18221539964 (微信同號)上海睿鉑賽生物科技有限公司2022.3.18
一般建議 1、妥善保存試劑仔細閱讀數據表并將試劑存放在適當的位置。一些套件需要在不同溫度下儲存不同的組件。 2、平衡試劑以測定溫度使用培養箱或水浴將所有試劑(酶除外)平衡至測定溫度。酶應解凍并保存在冰上或在測定期間保持在 4°C。 3、運行測試標準曲線 確保試劑沒有任何問題,并確保您仔細按照說明進行操作。除非數據表中另有說明,否則您的標準曲線應該是線性的,并生成與示例圖相似的結果。 4、初步樣品系列稀釋如果這是您第一次運行特定類型的樣品,請使用微量離心管對您的樣品進行 2 倍系列稀釋。使用原始樣品和稀釋樣品運行測定,以確定是否需要稀釋以及*佳稀釋因子。在所有后續實驗中使用選擇的稀釋因子。 5、小心移液 孔之間的一致性非常重要;小心地從孔的一側移液,確保所有孔的體積相同,所有試劑都流到底部。特別注意避免氣泡,這會破壞吸光度讀數。 特殊情況: ?檢測不工作(無信號) 可能的原因解決方案檢測緩沖液太冷,導致酶活性低將試劑平衡至室溫或指定的測定溫度。在方案中省略試劑或步驟重新閱讀數據表并仔細按照說明進行操作。讀板波長不正確重新閱讀數據表并仔細按照說明進行操作。使用不正確的微孔板吸光度:透明板;熒光:黑色板(底部可以是透明或黑色);發光:白板。 ?帶有特殊信號的樣本 可能的原因解決方案不兼容的樣品類型重新閱讀數據表以獲取兼容樣品列表。樣品制備不當對于酶活性測定,不要對樣品進行脫蛋白。脫蛋白會殺死所有酶活性。如果您確實需要去蛋白,請確保您已正確中和您的樣品。EDTA 是一種金屬螯合劑,會干擾我們的一些檢測。任何測量金屬離子或需要金屬輔因子的測定都與 EDTA 不相容。 ?信號太高 可能的原因解決方案標準太濃,信號飽和返回數據表并確保正確完成標準稀釋。工作試劑制備不正確,信號飽和返回數據表并確保正確制備工作試劑。樣品濃度太高稀釋樣品并重復實驗。 ?信號太低 可能的原因解決方案試劑儲存不正確檢查試劑是否已正確存放。如果儲存不當,它們可能會迅速降解。試劑已過期檢查套件的保質期。樣品太稀用更多的細胞/組織濃縮或重新制作您的樣品。 ?信號上下跳躍 可能的原因解決方案未混合和不均勻的孔快速敲擊盤子數次以徹底混合內容物。well中的氣泡檢查孔中是否有氣泡。重復測定和移液器小心避免氣泡。沉淀在well中仔細檢查沉淀物或混濁度。確定沉淀的原因并稀釋、脫蛋白或使用其他替代樣品處理來消除沉淀。 ?標準曲線不是線性的 可能的原因解決方案移液錯誤和可變性重新制作標準稀釋液,并在小心移液時嚴格按照說明進行操作。計算錯誤重新檢查計算。一些化驗有不同的方程式。標準曲線可能是非線性擬合有關擬合方程和示例圖,請參閱數據表。
虎年將至,上海睿鉑賽生物科技有限公司真誠地祝福您新年快樂,虎年好運~ 感謝您在過去一年中的支持與信任,在新的一年里,我們將繼續努力,為您提供更優質、更專業的產品與服務。 上海睿鉑賽生物 2022 年春節將提前放假:1 月 29 日至 2 月 6 日放假休息,2 月 7 日(初七)正常上班。在放假期間,如有任何事宜均可郵件聯系我們(service@rebiosci.net) 。 再次祝您新年快樂,虎年大吉!上海睿鉑賽生物科技有限公司 2022.1.28